Utilización de los test de Fluorescencia Polarizada (FP) y Elisa de Competencia (C-Elisa) en el diagnóstico de brucelosis de camélidos

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Summary: Brucellosis is a zoonotic disease representing a risk contact with, or consuming, their raw milk and raw dairy several animal species, including camelids, the aim of this Polarization assay (PF) and Competitive ELISA (C-ELISA), along with conventional serological tests such as the Rose Complement Fixation test (CF). A total of 336 serum samples herd of the IXth Region (Chile), clinically and serologically analyzed considering a threshhold of 98.7 milipolarization of them obtained by means of the median of the last percentile. SAT tests. The CF results were not included as many samples the FP and C-ELISA tests, two samples were positive in point, the significance of which is discused in the text. .

Key words: PF, C-ELISA, llamas, alpacas.

Resumen: En Chile, como en muchos países de Latinoamérica, la brucelosis es una zoonosis presente, representando no sólo un factor de riesgo para las explotaciones pecuarias sino también para quienes laboran y hacen usufructo de ella, especialmente por el consumo de leche cruda y sus derivados. Como la Brucella afecta a diferentes especies de animales, el objetivo de este trabajo fue utilizar las técnicas de unión primaria, como son Fluorescencia Polarizada (FP) y Elisa de Competencia (C-Elisa), para la detección de anticuerpos anti-Brucella en suero de camélidos y, comparar sus respuestas con las pruebas de Rosa de Bengala (RB), Aglutinación Lenta en Tubo (SAT) y Fijación de Complemento (FC) en atención a que estas especies representan un potencial pecuario de cierta trascendencia.

Para ello se analizaron 336 sueros, de los cuales 315 pertenecían a llamas y 21 a alpacas, provenientes de un predio de la Novena Región clínica y serológicamente libre de Brucella.

Los resultados obtenidos señalan que el umbral de positividad para FP, calculado según la mediana del último percentil, fue de 98.7 milipolarizaciones (mP) y, el corte para C-Elisa con el mismo método fue de 32% de Inhibición (% I).

Todas las muestras analizadas dieron resultados negativos a RB y SAT. Los resultados con FC no pudieron ser considerados, por cuanto un alto porcentaje de las muestras fueron anticomplementarias. Con las técnicas de C-Elisa y FP, dos muestras reaccionaron positivamente en cada uno de los test con valores en el nivel de corte o levemente superiores. Se discute la significación de ellas.

Palabras claves: FP, C-Elisa, camélidos, llamas, alpacas.

INTRODUCCIÓN

Desde hace más de seis mil años los camélidos sudamericanos (CSA) forman parte del ambiente físico y cultural de la Región altiplánica Las especies domésticas: llama (Lama glama) y alpaca (Lama pacos), concentran su población en la I Región de Chile y representan sólo el 1% de la masa total del ganado existente en nuestro país (Torres, 1992; FAO, 1996; Chile, 1997). Sin embargo, la población está creciendo y se está expandiendo a la zona central y sur del país, cumpliendo un rol en la economía de pequeños productores por la comercialización de su carne, fibra y piel. En el mercado internacional, desde 1979 se inició en Chile un interés por exportar estos animales. Las normas de exportación incluyen diagnóstico para las enfermedades enumeradas como de cuarentena de máxima seguridad, entre las cuales está brucelosis. Para los camélidos, se ha estimado como fuente de infección el ganado caprino y ovino y una susceptibilidad (especialmente de alpacas) a Brucella melitensis tipo I. Sin embargo, existen escasos antecedentes al respecto. (Fernández-Baca, 1991; Murray, 1998).

Considerando que la enfermedad puede ser transmitida al hombre, especialmente por consumo de leche cruda y derivados, la presencia de Brucella no sólo representa un factor de riesgo para la explotación pecuaria sino también para quienes laboran o hacen usufructo de ella. La transmisión en los camélidos infectados con cepas lisas se estima que es la misma que en el ganado ovino y de cabras, en los cuales la ruta más usual es la ingestión de alimento y de agua que ha sido contaminada con excreciones corporales, o por contacto directo entre individuos. La placenta y los fluidos fetales de animales infectados son fuente importante de estos organismos, los cuales también son encontrados en la leche (Murray, 1998). Una vez infectados, los títulos séricos pueden ser detectados por los métodos usuales de diagnóstico para detección de Brucella lisa. Al respecto, los animales en cuarentena por importación al país (originarios de predios libres de tuberculosis y brucelosis) se les realiza pesquisa de Brucella lisa por Aglutinación Lenta en Tubo (SAT) y Rosa de Bengala (RB), pruebas oficiales de brucelosis en Chile para esta especie (Chile, 1999), habiéndose utilizado esporádicamente Fijación de Complemento.

Actualmente existen otras técnicas para el diagnóstico serológico de brucelosis que han sido usadas en diferentes especies animales y han demostrado una mayor sensibilidad y especificidad que las antes mencionadas, como son las técnicas de unión primaria Elisa de Competencia (C-Elisa) y Fluorescencia Polarizada (FP). Sin embargo, para los CSA se desconoce la interpretación de sus resultados. Por ello, el objetivo de este estudio es determinar el valor umbral (nivel de anticuerpos que separa los animales negativos o positivos (Wright y col., 1993)) para estas técnicas y hacer factible su introducción en el diagnóstico de brucelosis en estas especies animales.