Incremento en la proteína no degradable en rumen de vacas lecheras: 1. Efectos sobre la producción y composición de leche y utilización de nutrientes (página 2)
Enviado por R. Felmer, B.Q, PhD.
MATERIALES Y MÉTODOS
Este trabajo se realizó en la Estación Experimental Vista Alegre de la Universidad Austral de Chile, ubicada en el paralelo 39°47’ lat. sur y 73°13’ long. oeste, en Valdivia, Chile. El primer mes se consideró como período preexperimental. El experimento evaluó el ajuste en requerimientos de PNDR, mediante la inclusión de harina de pescado, sobre la producción y composición de leche y la eficiencia de utilización de los nutrientes.
PRODUCCIÓN, COMPOSICIÓN Y EFICIENCIA DE PRODUCCION DE LECHE
Diseño experimental. Doce vacas Holstein-Friesian, multíparas, entre 3 y 5 meses de lactancia, fueron agrupadas en 3 cuadrados latinos con cambio sobre diseño (Gill, 1981) con 4 períodos y 4 dietas. Cada período consistió en una primera semana de adaptación a la respectiva dieta y una segunda semana donde se colectaba la información. Los animales estaban estabulados y contaban con comederos y bebederos individuales. La ración se ofrecía en cantidades que consideraban hasta un 10% de rechazo. Cuando los animales consumían la totalidad de lo ofrecido, al día siguiente la ración se incrementaba en 5%.
Evaluación de las dietas. Se determinó materia seca (MS), proteína cruda (PC), fibra detergente neutro (FDN), fibra detergente ácida (FDA), nitrógeno insoluble en la fibra detergente neutro (FDNIN), nitrógeno insoluble en la fibra detergente ácida (FDAIN), Ca y P. Todas las dietas estudiadas tuvieron una relación ensilajes: concentrado de 65:35% (BMS). Las dietas identificadas como A1 y B1 incluían un 45% de ensilaje de pradera y un 20% de henilaje de alfalfa. Las identificadas como A2 y B2 incluyeron un 38% de ensilaje de pradera permanente y un 27% de henilaje de alfalfa. La diferencia entre las dietas "A" (A1 y A2) y las dietas "B" (B1 y B2) se obtuvo formulando las dietas "A" considerando, en el caso del N, sólo las recomendaciones de PC (NRC 1989), pero aceptando un déficit de hasta 20% en PNDR, mientras que las dietas "B" satisfacían los requerimientos de PC y de PNDR. Para ello se utilizaron valores de PNDR tabulados, empleando una tabla de composición de alimentos generada localmente (Anrique y col 1995).
Alimentos. Tanto el concentrado como el ensilaje ofrecidos, al igual que el rechazo, eran pesados diariamente. En el laboratorio se determinó MS del ensilaje por secado en horno a 105°C. La proteína cruda (PC) se determinó con la técnica de Kjeldhal de medición indirecta basada en una digestión ácida siendo el factor de conversión de N a proteína de 6.25 (AOAC 1996). La EM se estimó a partir de una regresión (Garrido y Mann 1981) del valor D (materia orgánica digestible/MS x 100), determinado in vitro, según el método de dos etapas de fluido ruminal y HCl pepsina (Tilley y Terry 1963). La determinación de FDN y FDA se realizó de acuerdo a Van Soest y col (1991), mientras que la de FDAIN y FDNIN se realizó de acuerdo a AOAC 1996. Del rechazo se tomaba una muestra diaria y se hacía un pool semanal en el que se determinaba MS en horno a 105°C y PC según Kjeldahl (AOAC 1996) para cuantificar de manera exacta el consumo. Los valores de degradabilidad en rumen de la proteína fueron tomados de tabla (Anrique y col 1995).
Leche. Los volúmenes de leche diarios se midieron diariamente en cada ordeña (6.00 y 16.30 horas) tomándose muestras de cada animal para la determinación de grasa, proteína y urea. Estas muestras se preservaron con dicromato de potasio y fueron refrigeradas a 4°C hasta ser enviadas al laboratorio. Tanto la proteína verdadera como la grasa fueron determinadas con un aparato Milko- Scan sistema 4000, serie 300 (Fosselectric, Dinamarca). La urea fue determinada por el método ureasa- Berthelot modificado (urea color Boehringer Mannheim).
ANALISIS ESTADISTICO. Los datos se analizaron con el paquete estadístico SAS (SAS 1995), empleando el procedimiento GLM, de acuerdo al siguiente modelo:
Yijkl = µ + Bi + Pj + Tk + Cl + Eijkl
Siendo: Yijkl = variable dependiente m = media de Y, considerada como la sumatoria en el período de 2 semanas Bi = efecto del bloque (i = 1,2,3,4) Pj = efecto del período (j = 1,2,3,4) Tk = efecto del tratamiento (k = 1,2,3,4) Cl = efecto del cuadrado latino (l= 1,2,3) Eijkl = error residual
Las variables, cuyo análisis de varianza dio como resultado diferencias significativas (P<0,05), fueron sometidas a una prueba de comparación de medias, utilizándose la prueba de contrastes ortogonales (95%). Se analizó también la interacción entre el nivel de PNDR y de henilaje de alfalfa.
RESULTADOS
COMPOSICION DE LAS DIETAS Y CONSUMO. El componente más importante (en base MS) de las dietas fue el ensilaje de praderas, seguido del henilaje de alfalfa. En el concentrado los granos de maíz y de avena y el gluten de maíz fueron ingredientes importantes. La diferencia principal entre las dietas denominadas A y B fue la presencia o no de harina de pescado y de harina de soya (cuadro 1). La harina de pescado utilizada , contenía (en base MS) 10,75% de extracto etéreo. Considerando la composición de nutrientes, la principal diferencia entre las dietas A y B fue el nivel de PNDR, ya que los contenidos de PC y energía fueron muy similares. Existieron diferencias significativas (P<0,05) en el consumo de PNDR entre dietas A y B, aunque no existieron diferencias entre las dietas denominadas 1 ni entre las 2, i.e. que tenían iguales relaciones entre ensilaje de pradera y henilaje de alfalfa. Los consumos totales de MS, PC y ENL no fueron diferentes (P>0,05) (cuadro 2). No existieron interacciones entre el nivel de PNDR y el nivel de inclusión de henilaje de alfalfa
PRODUCCION Y COMPOSICION DE LECHE. Existieron diferencias significativas (P<0,01) en producción de leche entre dietas con diferentes niveles de PNDR (dietas A vs. B), diferencias que se explican por los mayores niveles de producción obtenidos con las dietas B1 vs A1 (P<0,01) (cuadro 3). Los análisis de contrastes ortogonales muestran que las dietas B generaron un mayor contenido y producción de proteína láctea (P<0,01). Para el contenido de proteína, este efecto fue significativo solamente en la dieta con mayor nivel de henilaje de alfalfa (dieta B2). Por otro lado, aunque las producciones de grasa no fueron diferentes, los contenidos de grasa en la leche fueron significativamente mayores en las dietas suplementadas con harina de soya (dietas A) (P<0,01), independientemente de la combinación de forraje utilizada. No existieron diferencias entre los tratamientos (P>0,05) en el contenido de N ureico en leche aunque los mismos estuvieron por debajo de los valores considerados críticos (19 mg dl-1). No existieron interacciones entre el nivel de henilaje de alfalfa y de PNDR, excepto para el contenido de proteína láctea expresado en porcentaje.
Cuadro 1. Composición de ingredientes y nutrientes de las dietas utilizadas (% base MS). | ||||||
Ingredients and nutrient composition of the diets (% DM basis). | ||||||
Ingrediente | A 1 | B 1 | A 2 | B 2 | PP ensilaje | AA henilaje |
Ensilaje de pradera | 45 | 45 | 38 | 38 | x | x |
Henilaje de alfalfa | 20 | 20 | 27 | 27 | x | x |
Maíz | 14,97 | 15,04 | 15,28 | 15,71 | x | x |
Avena | 7,02 | 7,65 | 6,56 | 6,22 | x | x |
Triticale | – | – | – | 2,68 | x | x |
Harina de pescado | – | 4,46 | – | 4,67 | x | x |
Afrecho de soja | 5,32 | – | 5,08 | – | x | |
Gluten de maíz | 7,84 | 7,01 | 7,18 | 4,93 | x | x |
Mezcla mineral | 0,85 | 0,84 | 0,90 | 0,79 | xx | x |
Nutrientes | ||||||
MS | 45,95 | 46,10 | 47,02 | 47,33 | 17,1 | 40,0 |
PC z | 15,29 | 15,60 | 15,77 | 16,16 | 12,1 | 19,5 |
PNDR y | 25,28 | 31,10 | 24,92 | 29,63 | 5,55 | 10,35 |
Proteína soluble x | ||||||
ENL x | 1,64 | 1,63 | 1,63 | 1,61 | 1,62 | 1,43 |
FDA z | 28,87 | 22,12 | 28,88 | 28,23 | 40,2 | 39,1 |
FDAIN z | 1,07 | 1,06 | 1,07 | 0,98 | 0,90 | 0,71 |
FDN z | 44,11 | 45,11 | 43,49 | 43,08 | 61,8 | 45,4 |
FDNIN z | 0,97 | 1,06 | 1,05 | 1,21 | 1,00 | 0,93 |
Cenizas | x | x | x | x | 8,25 | 8,68 |
Ca z | 0,68 | 0,98 | 0,63 | 0,90 | x | x |
P z | 0,41 | 0,56 | 0,42 | 0,47 | x | x |
Cuadro 2. Efecto del incremento de la PNDR mediante harina de pescado sobre consumo en vacas lecheras con dietas basadas en ensilaje. | |||||||||
Effects of increasing RUP through fish meal on intake of dairy cows on silage based diets. | |||||||||
Nivel ensilaje alfalfa Nivel PNDR | 20% | 27% | Contrastes | ||||||
Bajo | Alto | Bajo | Alto | ||||||
Consumo | A1 | B1 | A2 | B2 | SE | A1 vs B1 | A2 vs B2 | A v/s B | Interacción |
MS y ENL z PC y PNDR y | 19,56 32,1 2,99 0,756 | 19,30 31,5 3,01 0,936 | 20,61 33,6 3,25 0,810 | 19,87 32,1 3,21 0,951 | 0,21 0,31 0,04 0,01 | NS NS NS NS | NS NS NS NS | NS NS NS * | NS NS NS NS |
EFICIENCIA DE LA PRODUCCION DE LECHE Y DE PROTEINA. Considerando la conveniencia de incrementar la eficiencia de producción de leche y, particularmente, de los componentes de la leche, se analizaron los efectos de las diferentes formas de suplementar con concentrados sobre la eficiencia de producción de leche y de proteína (cuadro 4). Se observó que las dietas formuladas para aportar más PNDR (dietas B) generaron mejores eficiencias de utilización de la MS y de la ENL consumidas para la producción de leche (sin corregir), de leche corregida al 4% de grasa (LCG), producción de grasa y de proteína. Estas diferencias en producción de leche y de leche corregida al 4% de grasa fueron más importantes en las dietas que contenían mayores niveles de ensilaje de pradera (dietas 1). No existieron diferencias entre las dietas respecto a la utilización de la PC (P>0.05). Tampoco existieron interacciones entre el nivel de PNDR y de henilaje de alfalfa.
Cuadro 3. Efecto del incremento de la PNDR mediante harina de pescado sobre producción y composición de leche en vacas lecheras con dietas basadas en ensilaje. | |||||||||
Effects of increasing RUP with fish meal on intake and milk production and composition from dairy cows fed silage based diets. | |||||||||
Nivel PNDR | Bajo | Alto | Bajo | Alto | Contrastes | ||||
Variable | A1 | B1 | A2 | B2 | SE | A1 vs B1 | A2 vs B2 | A v/s B | Interacción |
Producción de leche v | 24,2 | 25,7 | 25,5 | 25,7 | 0,24 | ** | NS | ** | NS |
LCG 4% v | 24,4 | 25,4 | 25,7 | 24,9 | 0,28 | NS | NS | NS | NS |
Proteína x | 3,07 | 3,10 | 3,03 | 3,14 | 0,016 | NS | ** | ** | * |
Producción de proteína y | 0,74 | 0,80 | 0,77 | 0,81 | 0,008 | ** | ** | ** | NS |
Grasa x | 4,08 | 3,91 | 4,04 | 3,79 | 0,041 | * | * | ** | NS |
Producción de grasa y | 0,98 | 1,01 | 1,03 | 0,97 | 0,013 | NS | NS | NS | NS |
N ureico en leche z | 17,50 | 17,14 | 18,22 | 18,33 | 0,200 | NS | NS | NS | NS |
(v: lts día -1; x:%; y: kg día -1; z: mg dl -1). **: P<0,01; * P<0,05; NS: P>0,05. |
Cuadro 4. Efecto del incremento de la PNDR mediante harina de pescado sobre la eficiencia de utilización de los nutrientes consumidos para la producción de leche, LCG y proteína en vacas lecheras con dietas basadas en ensilaje. | |||||||||
Effects of increasing RUP with fish meal on efficiency of utilization of nutrients intake for milk, FCM and protein production in dairy cows fed silage based diets. | |||||||||
Relación | A1 | B1 | A2 | B1 | SE | A1 vs B1 | A2 vs B2 | A v/s B | Inter- acción |
Prod/MS v | 1,25 | 1,34 | 1,24 | 1,30 | 0,012 | ** | * | ** | NS |
Prod/ENL x | 0,758 | 0,820 | 0,764 | 0,806 | 0,007 | ** | * | ** | NS |
Prod/PC v | 8,31 | 8,62 | 7,92 | 8,15 | 0,11 | NS | NS | NS | NS |
LCG/MS v | 1,25 | 1,32 | 1,24 | 1,26 | 0,015 | ** | NS | * | NS |
LCG/ENL x | 0,762 | 0,811 | 0,768 | 0,773 | 0,009 | ** | NS | ** | NS |
LCG/PC v | 8,27 | 8,61 | 7,80 | 8,08 | 0,146 | NS | * | NS | NS |
Prot/MS y | 0,038 | 0,041 | 0,038 | 0,041 | 0,0004 | ** | ** | ** | NS |
Prot/ENL z | 0,023 | 0,025 | 0,023 | 0,025 | 0,0002 | ** | ** | ** | NS |
Prot/PC y | 0,254 | 0,267 | 0,239 | 0,256 | 0,0035 | NS | NS | NS | NS |
Prod: producción diaria de leche; Prot: producción diaria de proteína láctea. (v: lt kg. -1; x: lt Mcal -1 ; y: kg kg -1; z: kg Mcal -1). **: P<0,01; *: P<0,05; NS: P>0,05. |
DISCUSIÓN
CONSUMO, PRODUCCION Y COMPOSICION DE LA LECHE. Las diferencias significativas (P<0.05) en el consumo estimado de PNDR entre las dietas A y B (cuadro 2) se relacionan a los mayores contenidos de harina de pescado en las dietas B, ya que no existieron diferencias en el consumo de MS ni de PC. Los análisis de contrastes ortogonales (cuadro 3) indicaron que las dietas suplementadas con harina de pescado (dietas B) produjeron más leche. La no existencia de diferencias en leche corregida al 4% de grasa se explica por la inclusión de harina de pescado que contenía 10,75% de aceite, ya que se ha demostrado que altos niveles de grasa en la ración deprimen el contenido de grasa de la leche (Hussein y Jordan 1991, Spain y col 1995).
La mayor producción de leche de dietas con mayor nivel de PNDR (B versus A) puede tener diferentes explicaciones. Varios autores (Wohlt y col 1991, Carrol y col 1994, O’Mara y col 1998, Wright y col 1998) encontraron que, al suplementar con harina de pescado como fuente de PNDR, se incrementa el perfil aminoacídico en el duodeno, particularmente de lisina y metionina, generalmente considerados como limitantes. Las dietas B tuvieron un efecto claro en la proteína de la leche: produjeron tanto una mayor concentración como un mayor rendimiento de proteína (P<0,05) (cuadro 3). Esta respuesta en producción de proteína puede ser explicada por un mayor consumo de PNDR; en este trabajo se encontró una correlación significativa (r=0,71) entre consumo de PNDR y proteína de la leche en las dietas B, es decir, ajustadas por PNDR. Esta respuesta fue mejor en las vacas que recibieron una mayor proporción de henilaje de alfalfa (dietas 2) y que fueron suplementadas con concentrado conteniendo harina de pescado, ya que la interacción entre nivel de PNDR y de henilaje de alfalfa fue significativa (P<0,05). Esto podría ser el resultado de un mejor flujo de aminoácidos esenciales al intestino (Santos y col 1998).
Los efectos del consumo de energía, PC y PNDR sobre la composición de la leche han sido extensamente investigados. Nuestros resultados coinciden con Emery (1978), quien describe que el porcentaje de PC de la dieta se relacionó al contenido de proteína de la leche (r=0,59); en nuestro ensayo esta correlación fue menor (r=0,37) pero significativa (P<0,05). Existió una alta correlación entre consumo de ENL y producción de proteína (r=0,68), valor mayor que el descrito por Emery (1978) (r=0,42) aunque menor que el valor encontrado por De Peters y Cant (1992) (r=0,89).
Roseler y col (1993) relacionaron diferentes factores que afectan la producción de proteína de la leche, los cuales fueron descritos a través de la siguiente ecuación de regresión múltiple:
Producción de proteína de leche (kg/día)= –0,041 + 0,023*producción de leche + 0,022*Consumo de PNDR + 0,006* consumo de ENl (r2 = 0,86).
En nuestro trabajo, estos factores se relacionan de manera similar (datos no presentados). Esto implica que producción de leche, y consumo de PNDR y ENL contribuyen a explicar las producciones diarias de proteína de la leche.
Las dietas con mayores niveles de PNDR probablemente generaron un mejor patrón de aminoácidos a nivel intestinal, debido a la inclusión de una fuente balanceada de PNDR (harina de pescado). El uso de este suplemento incrementó la producción de leche y su contenido de proteína, con una reducción en el contenido de grasa. Esto último puede ser explicado por un efecto negativo del aceite presente en la harina de pescado sobre la producción de ácidos grasos volátiles (AGV) microbianos (Hussein y Jordan 1991) o por una alteración en el metabolismo lipídico postabsorción (Spain y col 1995). Un efecto similar puede haber ocurrido en nuestro trabajo y ha sido descrito por otros (Grummer y col 1996, O’Mara y col 1998). La PNDR aportada por la harina de pescado puede haber mejorado el patrón de aminoácidos, aunque el flujo total de estos nutrientes ha mostrado sólo un ligero incremento en otros experimentos (De Peters y Cant 1992, Clark y col 1992), aunque este efecto podría ser mayor en dietas basadas en henilaje de alfalfa (Dhiman y Satter 1993)
La inexistencia de una interacción entre la cantidad de PNDR y de ensilajes discrepa con los resultados de otros autores, que describen un efecto importante de la fuente de ensilaje sobre la producción de leche, observándose una mejor producción con dietas basadas en ensilaje de alfalfa versus ensilajes de ballica inglesa (Broderick y col 2002) o de trébol rosado (Broderick y col 2001), lo que se explica en parte por los mayores consumos de las dietas con ensilaje de alfalfa. En nuestros resultados, si bien los consumos son mayores en dietas con mayores niveles de alfalfa (dietas 2), este mayor consumo no es significativo, lo que posiblemente se explica por la escasa diferencia en el nivel de alfalfa entre las 2 dietas (i.e. 20 vs. 27%, base MS) .
En relación al contenido de N ureico en leche (cuadro 3), este parámetro está siendo considerado cada vez con mayor importancia como un indicador de desbalances nutricionales así como de potenciales problemas reproductivos. Esto último ha sido atribuido a un incremento del amoníaco en rumen y en sangre que podría reducir la secreción de progesterona, alterar el pH uterino o incrementar el balance energético negativo (Butler 2000). Los valores encontrados en este ensayo no fueron diferentes entre tratamientos y todos los valores fueron menores a los considerados críticos (19 mg/dl) por investigadores norteamericanos (Baker y col 1995) como indicadores de desbalances entre la tasa de degradación ruminal de carbohidratos y de proteínas y como indicador de posibles problemas reproductivos. Algunos trabajos han observado una relación entre consumo de PNDR y N ureico en leche, lo que se ha atribuido a una utilización de aminoácidos, sea endógenos o provenientes de la dieta como sustratos para neoglucogénesis (Roseler y col 1993, Polan y col 1997, Rodríguez y col 1997). En este trabajo, los animales alimentados con las dietas con mayores niveles de PNDR no mostraron un incremento en N ureico, indicando probablemente que el total de proteína ofrecida en la dieta no excedía los requerimientos
EFICIENCIA DE LA PRODUCCION DE LECHE Y DE PROTEINA LACTEA. Las dietas B (con mayores aportes de PNDR) permitieron una mayor eficiencia de utilización de la MS y de la ENL para producción de leche, LCG y proteína (cuadro 4). Estas eficiencias son menores que las descritas por Broderick y col (2002), quienes obtuvieron 1,65 a 2,15 lts de leche por kg de MS consumida, aunque en su caso las dietas tenían mayores niveles de proteína y la dieta era de mayor calidad, a juzgar por su contenido de FDA. No existieron diferencias en la utilización de la PC, lo que discrepa con Baker y col (1995), aunque en su caso los desbalances en los aportes de proteína entre las dietas fueron mayores que en nuestro experimento. Broderick y col (2002) obtuvieron mejores eficiencias de utilización del N consumido, con valores entre 378 y 295 g/kg de proteína consumida, diferencias que también pueden explicarse a partir de la mayor digestibilidad de la dieta. La mayor eficiencia de utilización de la MS y de la energía consumida observada en nuestro ensayo puede ser explicada por un ajuste más preciso de los aportes de nutrientes en las dietas con mayores niveles de PNDR, aportada por la harina de pescado
AGRADECIMIENTOS
A los profesores R. Smith y F. Mujica en el diseño experimental y análisis estadístico; a los Drs. S. Tamminga y P. Chilibroste por la revisión crítica del artículo.
REFERENCIAS
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D Ibarra1, L Latrille2 1 Dirección actual: Departamento de Reproducción Animal, Facultad de Veterinaria, Universidad de la República, Lasplaces 1550, Montevideo, Uruguay. 2 Instituto de Producción Animal, Universidad Austral de Chile, Valdivia, Chile. # Financiado por Proyecto FONDECYT 1961045.
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