Diagnóstico de brucelosis bovina en leche por el Ring Test y ELISA en lecherías de la provincia de Ñuble (VIII Región)

• Material y métodos
• Resultados y discusión
• Bibliografía

RESUMEN: Se utilizaron los métodos de ELISA y Ring Test en leche para diagnosticar brucelosis bovina en estanques de recolección en frío a 60 predios lecheros de la provincia de Ñuble, VIII Región de Chile, durante los meses de noviembre y diciembre de 1995. Estos fueron estratificados en relación al número de vacas en producción de leche. Los resultados obtenidos por ambos métodos fueron similares, 18 muestras positivas y 42 negativas. La diferencia se estableció en 5 muestras (8.3%) que fueron clasificadas como positivas débiles al Ring Test y confirmadas como positivas por ELISA. Se determinó que la prevalencia predial de brucelosis bovina fue de un 30% en predios lecheros con estanque enfriador en la provincia de Ñuble. El método de ELISA resultó ser una prueba confiable para diagnosticar brucelosis bovina en leches colectivas.

Palabras claves: ELISA, leche, prevalencia.

SUMMARY: Bovine brucellosis diagnosis in milk by Ring Test and Elisa in dairy farms of Ñuble (VIII Region, Chile)

ELISA and Ring Test were compared as diagnostic tests for bovine brucellosis in bulk tank refrigerated milk from 60 dairies in the Ñuble Province, VIII Region, Chile, from November to December. Samples were stratified according to the number of cows in the farm. Diagnosis obtained from both methods gave similar results: 18 positive and 42 negative. The difference was established in 5 samples (8.3%) that were classified as weak positive to the Ring Test and confirmed as positives by ELISA. Furthermore, it was determined that there was 30% prevalence of bovine brucellosis in dairies with refrigerated tanks in the Ñuble province. The ELISA proved to be a reliable diagnostic test of bovine brucellosis in bulk milk.

Key words: ELISA, milk, prevalence.

INTRODUCCION

La brucelosis es una enfermedad infectocon-tagiosa, aguda o crónica, que afecta tanto a los animales como al hombre, causada por bacterias del género Brucella. Se reconocen actualmente seis especies: B. melitensis, B. abortus, B. suis y B. neotomae del grupo S y B. ovis y B. canis del grupo R (Corbel y Brinley-Morgan, 1984). Las cepas de Brucella de una misma especie difieren en algunas características, lo que ha permitido clasificarlas en biotipos para estudios epidemio-lógicos (Meyer, 1990). Las pérdidas económicas, expresadas en la disminución de la productividad en el rebaño bovino, se resumen en una menor producción de terneros por abortos, infertilidad en vaquillas, aumento del lapso interparto, menor producción de leche, alta tasa de reemplazos y pérdidas de peso en canales de carne (Nicoletti, 1994).

El último estudio de prevalencia nacional en Chile desde la IV a la X Región en el año 1991, fue de un 2.4%. La baja disminución de la prevalencia, en comparación al año 1982 (2.9%), ha decidido al Ministerio de Agricultura aplicar el programa de erradicación de la enfermedad (Vera, 1996).

Actualmente para el diagnóstico de la brucelosis bovina existen diversos métodos de diagnóstico, que varían en sensibilidad y especificidad (MacMillan, 1990; Díaz y Blasco, 1994). De éstos, los más utilizados en suero sanguíneo son Seroaglutinación Estándar (SAE), Fijación del Complemento (FC), Rosa Bengala (RB) y Rivanol (Riv). En leche, el más utilizado es el Ring test (RT). Ultimamente se han incorporado métodos inmunoenzimáticos o ELISA, tanto en suero sanguíneo como en leche (Nielsen y col., 1988, 1989; Nielsen, 1990). El RT es un método satisfactorio y poco costoso para inspección de rebaños lecheros en la detección de brucelosis; sin embargo, la principal limitación es el factor de dilución que ocurre en los grandes rebaños lecheros con grandes cantidades de leche que se almacenan en los estanques de recolección y las reacciones falsas positivas como resultado de vacunaciones con cepa 19, período de lactancia, condiciones ambientales e infecciones no específicas (Nicoletti, 1994). Todos los isotipos de anticuerpos en la leche (IgA, IgM, IgG1 e IgG2) pueden tomar parte en el RT positivo, pero la presencia de IgA en aquellas reacciones positivas, con o sin otro isotipo, indica que éste es el principal isótopo involucrado en la reacción junto a IgM (Sutra y col., 1986; Díaz y Blasco, 1994). En 1992, Durand y col. compararon los resultados del RT con los obtenidos por métodos serológicos, concluyendo en la necesidad de incorporar una prueba más sensible que pueda ser utilizada en volúmenes mayores de leche, ya que un gran número de muestras negativas al RT fueron serológicamente positivas a Fijación de Complemento. Heck y col. (1980) compararon los resultados de ELISA en leche y suero sanguíneo de un mismo animal. Ellos indicaron que sólo una muestra resultó negativa en leche y positiva en suero, indicando una alta correlación entre el test de ELISA en leche con los diagnósticos serológicos. Por otro lado, Thoen y col. (1983) concluyen que ELISA en leche es más específico e igualmente sensible que el RT. Boraker y col. (1981) demostraron una alta correlación entre el ELISA en leche con los cultivos bacteriológicos. Sin embargo, Bercovich y Taaijke (1990) señalan que aunque el ELISA es una prueba altamente específica, puede fallar algunas veces en detectar Ac contra Brucella en estanques que contengan leche de una única vaca infectada (con baja concentración de IgG1). Por otro lado, Kerkhofs y col. (1989) obtuvieron una especificidad para ELISA en leche y RT de 99.9% y 99%, respectivamente, y una sensibilidad de 98.6% para ELISA y 56% para el RT.

El presente trabajo tiene como objetivo determinar la eficiencia de la prueba ELISA en el diagnóstico de la brucelosis bovina en leche a partir de estanques enfriadores, comparándola con la prueba del RT y la determinación de la prevalencia predial en los principales planteles lecheros de la provincia de Ñuble, Chile.