El Virus del Papiloma Humano (VPH) es el principal causante del cáncer de cérvix. Es el virus más comúnmente transmitido por vía sexual. Uno de los avances más significativos ha sido la identificación de la etiología del cáncer cérvico uterino, al esclarecer el papel que juega en el desarrollo de las lesiones intraepiteliales el Virus de Papiloma Humano (VPH)
De acuerdo con estimaciones estadísticas se calcula que el 80% de las personas con vida sexual activa tienen contacto con el VPH y aunque la mayoría elimina la infección de forma natural, el 1% adquiere una infección persistente y está en riesgo de desarrollar un tumor maligno.
Existen alrededor de 120 tipos de VPH registrados en el mundo. De estos, 18 están asociados al cáncer cervicouteríno (CaCu). La relación entre VPH y el CaCu es tan alta que se ha demostrado que el 99.9% de los casos de tumores en el cérvix contienen una infección por VPH. Los profesores Harold zur Hausen y Lutz Gissman descubrieron entre 1981 y 1984 los VPHs asociados a neoplasias genitales: los tipos 6 y 11 asociados a neoplasias benignas, como el condiloma acuminado y los tipos 16 y 18 asociados al cáncer cervical. Con estos descubrimientos se inició el estudio intenso de los VPhs a nivel mundial y su asociación con esta enfermedad
Los tipos de VPH se dividen en dos grupos, el de Alto Riesgo y el de Bajo Riesgo dependiendo de su asociación con el desarrollo del cáncer. Esta clasificación resalta la relevancia de identificar el tipo de VPH que esté provocando una infección, puesto que esto determinará la atención que requiera la paciente. Se ha comprobado que entre los VPH de Alto Riesgo los tipos "16" y "18" son responsables del 70% de los tumores malignos. Por otro lado los VPH tipos "6" y "11" (de Bajo Riesgo) ocasionan entre el 85 y el 95% de los casos de verrugas genitales.
Otro factor de riesgo importante son las coinfecciones, las cuales tienen una prevalencia del 40%. El porcentaje de coinfecciones de virus de Alto y Bajo Riesgo juntos es de un 20%.
TIPO DE VPH | LESIÓN ASOCIADA |
Cutáneos1,42,43,105,8,14,17,2079,12,15,19,21-25,36,46,4741 | Verruca plantarisVerruca vulgarisVerruca planaEpidermodisplasia verruciformisVerrugas del carniceroEpidermodisplasia verruciformisCarcinoma de células escamosas cutáneas |
Mucosos61113,3216,18,31,33,35,45,51,52,56303934,584042434454555759 | Condiloma acuminadoPapiloma laríngeoHiperplasia epitelial focalNIC, Carcinoma de cérvixNIC, Carcinoma laríngeoNIC, Carcinoma de cérvix y peneNICNIC, NIPNIC, papiloma vulvarNIC, hiperplasia vulvarNIC, condiloma vulvarCondiloma acuminadoPapulosis BowenoideNICNIV |
Cuadro 1. Lesiones asociadas a diferentes tipos de VHP. NIC = Neoplasia intraepitelial del cérvixNIP = Neoplasia intraepitelial del pene NIV = Neoplasia intraepitelial de la vulva | |
Diagnóstico
La detección temprana y el tratamiento oportuno del VPH en lesiones precancesoras pueden evitar la progresión a cáncer. Los métodos principales de diagnosticos han sido la histopatología y métodos citológicos como el papanicolaau, que busca cambios en células de la zona trasformada. Recientemente se han introducido los métodos moleculares para detectar VPH. El sistema actual de reporte para clasificar la citología cervical es el de Bethesda.
EL Papanicolaou. La prueba se desarrolla en células obtenidas de un raspado de la pared cervical, que son posteriormente colocadas en una laminilla, fijadas, teñidas y estudiadas al microscopio. La presencia de koilocitos es el indicador clave de una infección por VPH, sin embargo el grado de avance de la lesión debe ser determinado por un estudio histopatológico.
El diagnóstico histopatológico se logra al estudiar al microscopio fragmentos de tejido cervical obtenidos a partir de una biopsia. Este estudio permite diferenciar los estratos del epitelio cervical, detectando así el nivel de infiltración de las células infectadas, así como áreas de invasión. El diagnóstico histopatológico es la prueba de oro para la detección y etapificación de las lesiones cervicales inducidas por VPH.
La terminología utilizada en el diagnóstico citológico e histopatológico de las lesiones cervicales pre-malignas ha cambiado gradualmente. Lo que inicialmente se conocía como Displasia Leve corresponde a NIC1, de igual forma la Displasia Moderada corresponde a NIC2 y la Displasia Severa a NIC3, en la clasificación citológica del Sistema Bethesda la infección por VPH y la NIC1 han sido agrupadas como Lesiones Intraepiteliales Escamosas de Bajo Grado (LSIL por sus siglas en inglés), mientras que las NIC2 y NIC3 han sido designadas Lesiones Intraepiteliales Escamosas de Alto Grado (HSIL por sus siglas en inglés).
También pueden ser visualizadas áreas específicas de células infectadas por VPH gracias a la reacción producida por la aplicación de ácido acético diluído sobre el tejido afectado. La reacción produce la formación de zonas blanquecinas (lesión acetoblanca) temporales, que indican la presencia del virus. La visualización de tales zonas se hace a través de un colposcopio, y esta técnica es normalmente usada como una herramienta para la toma dirigida de biopsias a ser analizadas por histopatología, y posteriormente para el tratamiento de las lesiones.
Además de las técnicas del laboratorio clínico existen hoy en día métodos moleculares para la detección del VPH.
En Biología Molecular Diagnóstica contamos con las siguientes pruebas moleculares para detectar la infección con el VPH:
• PCR e hibridación reversa: El PCR es una técnica específica y sensible que permite la detección genérica de un amplio número de tipos de VPH, o que puede también ser utilizada para la detección específica de un solo tipo viral. Esta prueba tiene la ventaja de que permite detectar coinfecciones, identifica el tipo viral tanto de bajo como de alto riesgo, cuenta con un control interno que garantiza que la muestra fue bien tomada
• PCR y secuenciación: La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es un método que permite la detección de cantidades ínfimas de DNA viral, mismo que se localiza específicamente incluso si se encuentra mezclado con millones de hebras de DNA de la célula hospedera. Esta prueba tiene la ventaja que permite identificar el tipo viral tanto de bajo como de alto riesgo, cuenta con un control interno que garantiza que la muestra fue bien tomada, pero no detecta coinfecciones.
• Captura de Híbridos: La captura de híbridos ha sido diseñada para detectar grupos virales, por lo que se puede aplicar para la búsqueda de grupos de virus de bajo riesgo o de alto riesgo. Esta prueba tiene la ventaja que permite detectar coinfecciones pero no identifica el tipo viral, solo detecta virus de alto riesgo, y no cuenta con un control interno que garantice que la muestra fue bien tomada. la Captura de Híbridos es una técnica para la detección del DNA viral que utiliza un método colorimétrico para la determinación de muestras humanas positivas a la presencia del virus. La captura de híbridos se basa en la formación de híbridos de moléculas de DNA viral con sondas específicas de RNA, estos híbridos se exponen al reconocimiento de anticuerpos especialmente diseñados y que se encuentran acoplados a moléculas coloridas, las que son finalmente detectadas en un luminómetro.
Sensibilidades de los métodos de diagnóstico de VPH
Método | Sensibilidad | |
Citología líquida | 75% | |
Detección molecular | 94% | |
Citología + Molecular | 98% | |
Beneficios de las Pruebas Moleculares:
Es posible realizar una sola toma de muestra para la citología de base liquida y de ahí tomar material para detectar al VPH por cualquiera de las técnicas de biología molecular. Las técnicas moleculares ofrecen una alta sensibilidad, lo que permite una detección precoz de la enfermedad.
El Papanicolaou no detecta presencia de VPH, sólo la transformación de células anormales causada por el VPH. Un dato importante es que entre el 10 y el 30 % de las mujeres que presentan un Papanicolaou normal, están infectadas con el VPH. Existen métodos por biología molecular para la detección directa del virus, este tipo de diagnóstico es altamente recomendable, con una alta sensibilidad y resulta ser preventivo ya que puede determinar el riesgo de desarrollar cáncer del cuello uterino.
Biología Molecular del Virus del Papiloma Humano
El virus del papiloma, VP, pertenece a la familia Papillomaviridae, una familia recientemente reconocida como distinta de los polyomavirus por el Consejo Internacional para la Taxonomía de los Virus (ICTV). Estos virus están ampliamente distribuidos en la naturaleza. Infectan específicamente el epitelio escamoso de más de 20 especies diferentes de mamíferos, así como aves y reptiles.
La partícula viral del papiloma humano tiene una cápside de 72 capsómeros (60 hexámeros y 12 pentámeros), con un diámetro aproximado de 55nm y que contiene al genoma viral. Los capsómeros están hechos de dos proteínas estructurales: l1 en mayor proporción y L2. El VPH es relativamente estable y debido a que no tiene una envoltura, permanece infeccioso en un ambiente húmedo pos meses.
Autor:
Kelly Zambrano Zambrano