Características histoquímicas y morfométricas del músculo Gluteus mediusen equinos en preparación para competencias de salto. Estudio preliminar (página 2)
Enviado por J. L. Lopez-Rivero, M. V., Ph.D.
RESULTADOS
El estudio histoquímico realizado en este trabajo permitió determinar la composición fibrilar del músculo Gluteus medius de los equinos de salto debutantes. Los tipos de fibras del músculo Gluteus medius en el equino de salto en función de la profundidad se presentan en la figura 1.
Figura 1. Microfotografías (x 100) de cortes del músculo Gluteus medius, a 3 y 6 cm de profundidad, actividad miosín adenosín trifosfatasa miofibrilar. Fibras tipo I (I), tipo IIA (IIA) y tipo IIB (IIB). Microphotography (x 100) of Gluteus medius muscle cuts at 3 and 6 cm of depth, fibrillar miosine adenosine triphosphatase activity. Fibre type I (I), type IIA (IIA), and type IIB (IIB).
El porcentaje de fibras tipo I en equinos de salto en condiciones de reposo a la profundidad de 3 cm fue de 16.4%, aumentando a 26.9% a los 6 cm de profundidad, siendo esta variación esta-dísticamente significativa (p < 0.01) (cuadro 1).
Las fibras tipo IIA presentaron un promedio de 36.3% y 36.1% a 3 y 6 centímetros de profundidad, respectivamente, siendo esta diferencia estadísticamente significativa (p < 0.05) (cuadro l).
El porcentaje de fibras tipo IIB fue de 47.3% a la profundidad de 3 cm, disminuyendo a un 37% a los 6 cm de profundidad, siendo estas diferencias estadísticamente significativas (p < 0.01) (cuadro 1).
Cuadro 1. Tipos de fibras presentados como porcentajes (%) en el músculo Gluteus medius de equinos
(Promedios y desviación estándar). Fibre types presented as percentage (%) in Gluteus medius muscle of horses (Average and standard deviation).
Profundidad biopsia (cm) | Tipo de Fibra | ||
| I | IIA | IIB |
3 cm | 16.41 ± 4.7 a | 36.3 ± 3.2 | 47.3 ± 5.5 c |
6 cm | 26.9 ± 7.6 b | 36.1 ± 6.3 | 37 ± 11.3 d |
n = 10 Letras diferentes en sentido vertical indican diferencias significativas (p<0.01). Letras diferentes en el promedio general indican diferencias significativas (p<0.01). |
Cuadro 2. Fibras IIB oxidativas y IIB no oxidativas presentadas como porcentaje del total de fibras y como porcentaje de las fibras IIB (Promedios y desviación estándar). Oxidative and non-oxidative fibres presented as total fibre percentage and as fibre IIB percentage (Average and standard deviation).
Profundidad Biopsia (cm) | IIB | IIB OX | Tipo de fibra IIB no OX | % IIB OX | % IIB no OX |
3 cm | 47.3 ± 5.5 (100%) | 29.1 ± 3.1 | 18.2 ± 5.1 | 61.9 ± 6.7 | 38.1 ± 6.7 |
6 cm | 37 ± 11.3 (100%) | 24.7 ± 7.1 | 12.3 ± 6.4 | 67.6 ± 6.2 | 32.4 ± 6.2 |
n = 10. |
Al analizar la capacidad oxidativa de las biopsias musculares mediante la técnica NADH-TR (figura 2) se determinó que el porcentaje promedio de fibras tipo IIB oxidativas fue de 29.1% y 24.7% a 3 y 6 centímetros de profundidad, no existiendo variación significativa en los porcentajes según la profundidad de la biopsia (p > 0.05). Al expresar estos resultados como porcentaje del total de fibras tipo IIB, estas diferencias no tienen significancia estadística (p > 0.05) El porcentaje promedio de fibras IIB no oxidativas fue de 18.2% y 12.3% a 3 y 6 centímetros de profundidad, no existiendo variación significativa en los porcentajes (p > 0.05). Al expresar estos datos como porcentaje de las fibras IIB totales, no hay diferencia significativa (p > 0.05) (cuadro 2).
Figura 2. Microfotografías (x 100) de cortes del músculo Gluteus medius, a 3 y 6 cm de profundidad. Capacidad oxidativa evaluada por la reacción nicotina-mida adenina dinucleótido tetrazolium reductasa (OX: fibra oxidativa; NOX: fibra no oxidativa).
Microphotography (x 100) of Gluteus medius muscle cuts at 3 and 6 cm of depth. Oxidative capacity evaluated by nicotine amide dinucleotide tetrazolium reductasa (OX: oxidative; NOX: no oxidative).
El análisis morfométrico determinó que el diámetro mínimo promedio de las fibras tipo I, IIA y IIB fue de 19, 23, y 28 µm, existiendo diferencias significativas entre las fibras tipo IIB y las fibras tipo I y IIA (cuadro 3). El área promedio de las fibras tipo I, IIA y IIB fue de 2.335, 3.194 y 5.165 µm2, respectivamente, existiendo diferencias significativas en el tamaño entre las fibras IIB y las tipo I y IIA (cuadro 3).
DISCUSION
Para este estudio se obtuvieron biopsias del músculo Gluteus medius de equinos de salto debido a la importancia de éste en la propulsión del miembro pélvico (Lindholm y Piehl, 1974,), además este músculo es de gran tamaño, fácil acceso y ausente de estructuras vulnerables (Snow, 1983), lo que hace que este procedimiento tenga un riesgo mínimo para el animal.
Mediante el uso de técnicas histoquímicas en el músculo esquelético de los mamíferos, se ha logrado identificar dos poblaciones fibrilares: I y II. A su vez, el desarrollo de estas técnicas en equinos ha permitido identificar tres subtipos de fibras: IIA, IIB y IIC (Lindholm y Piehl, 1974; Essén-Gustavsson y col., 1980; Ronéus y col., 1991). El subtipo fibrilar IIC presenta una escasa frecuencia en animales adultos, siendo su proporción mayor en músculos juveniles y fetales (Essén-Gustavsson y col., 1980; Andrews y Spurgeon, 1986). Debido a que los equinos utilizados en este estudio eran adultos (4 años), la presencia de fibras IIC fue menor a un 2%, y se incluyeron en el porcentaje de fibras tipo IIB siguiendo las indicaciones mencionadas por Essén-Gustavsson y Lindholm (1985).
El sitio de muestreo tiene un importante efecto en la composición fibrilar. Se ha demostrado que existen pequeñas variaciones cuando las muestras han sido tomadas a partir del mismo sitio o de sitios contralaterales del mismo músculo, por lo tanto es muy importante estandarizar el lugar y la profundidad de muestreo (Snow y Guy, 1980; Henriksson-Larssén, 1985; Essén-Gustavsson y col., 1989). Por otra parte, está comprobado que una sola biopsia es una representación insuficiente del músculo completo, debido a la extensa variabilidad de las características histoquímicas dentro del músculo Gluteus medius de los equinos (Kai, 1984; Bruce y Turek, 1985; López-Rivero y col., 1992).
Cuadro 3. Areas (µm2) y diámetro menor (µm) de las fibras del músculo Gluteus medius en equinos presentados como promedio (x) y desviación estándar (DS). Area (µm2) and diameter (µm2) of Gluteus medius muscle fibres in horses presented as average and standard deviation (DS).
Tipo de fibra | Area fibra | Diámetro menor |
| µm2 | (µm) |
I | 2335 ± 1000 a | 19 ± 5 d |
II | 3194 ± 1014 b | 23 ± 5 |
IIB | 5166 ± 1708 c | 28 ± 6 e |
n = 10. (a y c, p<0.05), (b y c, p<0.05), d y e, p<0.05). |
En este estudio sólo se obtuvieron biopsias a 3 y 6 centímetros de profundidad, ya que son animales que presentan un Gluteus medius menor desarrollado si se compara con equinos de tiro (Islas y col., 1996, 1997). El patrón de variación de composición fibrilar según la profundidad de la biopsia es similar al obtenido en otras investigaciones (Bruce y Turek, 1985; Andrews y Spurgeon, 1986; Kline y col., 1987; López-Rivero y col., 1989b; Islas y col., 1996), existiendo un aumento significativo de las fibras tipo I con la profundidad de la biopsia (cuadro 1, figura 1).
El porcentaje de fibras tipo I es mayor que los indicados para la raza Standardbred sin entrenamiento (Henckel, 1983). Valores similares se describen para la raza Fina Sangre Inglés adultos sin entrenamiento (López-Rivero y col., 1989a) y menores al compararlo con equinos Andaluces, Arabes y Anglo-Arabes adultos sin entrenamiento (López-Rivero y col., 1989a, 1991). Las fibras tipo I se caracterizan por tener un perfil oxidativo. (Kai, 1984; Aguirre, 1995; López, 1995), característica que les otorga una mejor adaptación para funciones posturales y actividades dinámicas de bajo nivel y larga duración (López-Rivero y col., 1990, 1993a).
El porcentaje de fibras tipo IIA se mantiene sin variaciones en las dos profundidades estudiadas (cuadro 1), siendo su porcentaje menor al observado en equinos Anglo-Arabes y Fina Sangre Inglés adultos sin entrenamiento y Standardbred después de un período de entrenamiento (Henckel, 1983; López-Rivero y col., 1989a y b). Valores similares se encuentran al compararlos con las razas Andaluz, Arabe e Hispano-Bretón adultos sin entrenamiento (López-Rivero y col., 1989a, 1991, 1993c). Este tipo de fibra además de experimentar contracción rápida tiene una elevada capacidad oxidativa (Essén-Gustavsson y col., 1984; Ronéus y col., 1991).
El porcentaje de fibras tipo IIB disminuye en forma significativa con la profundidad de la biopsia (cuadro 1), observándose un mayor porcentaje a 3 centímetros de profundidad, lo que difiere de estudios realizados en otras razas en las que se ha determinado un aumento de este tipo fibrilar con la profundidad de la biopsia (Andrews y Spurgeon, 1986; Barlow y col., 1984; López-Rivero, 1995) y similares a los obtenidos en equinos Standardbred jóvenes sin entrenamiento (Henckel, 1983); esta diferencia podría deberse a que los equinos utilizados en esta investigación son producto de la cruza de las razas fina sangre inglés (50%) y Hackney (50%). Estas fibras poseen un perfil metabólico glucolítico y están invo-lucradas en la generación de fuerza propulsiva, rápida e intensa, de corta duración. (López-Rivero y col., 1993b).
Las fibras IIB oxidativas y no oxidativas presentaron una disminución de su proporción en relación con la profundidad (cuadro 2), esperándose cambios en los porcentajes de este tipo de fibra por efecto del entrenamiento. Otros autores han demostrado que un entrenamiento adecuado produce cambios en las fibras tipo II aumentando su capacidad oxidativa (Essén-Gustavsson y Lindholm, 1985; López-Rivero y col., 1991).
El área y diámetro de las fibras son similares a los obtenidos para otras razas (Essén-Gustavsson y Lindholm, 1985; López-Rivero y col., 1993a; Ronéus, 1992). Las fibras de menor tamaño y diámetro tienen un mejor abastecimiento de capilares, lo que permite una mejor irrigación y más difusión de oxígeno y sustratos a la célula y al mismo tiempo realizan una mejor eliminación de los productos del metabolismo de ellas (Essén -Gustavsson y col., 1989).
Los resultados obtenidos en esta investigación muestran que los equinos estudiados presentan una composición fibrilar del músculo Gluteus medius diferente a los equinos fina sangre de carrera, lo que se debería a que estos animales son el resultado de la cruza de equinos fina sangre y Hackney, por lo tanto se puede pensar que la composición fibrilar obtenida en estos equinos se debe al efecto de las cruza de las dos razas.
El estudio realizado permitió caracterizar la composición fibrilar y morfométrica del músculo Gluteus medius de equinos seleccionados para salto sin entrenamiento, resultados que pueden ser utilizados para estudiar posteriormente el efecto de diferentes modelos de entrenamiento sobre la composición fibrilar de este músculo.
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1Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad de Concepción, Casilla 537, Chillán. 2Escuela de Equitación de Carabineros "Oscar Cristi Gallo", Santiago. 3Facultad de Veterinaria, Universidad de Córdoba, España.
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