Efecto del ayuno durante dos tiempos de confinamiento y de transporte terrestre sobre algunas variables sanguíneas indicadoras de estrés en novillos

• Summary
• Introducción
• Material y métodos
• Resultados
• Discusión
• Conclusiones
• Bibliografía

RESUMEN

El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de dos períodos de ayuno en bovinos, ya sea en confinamiento o con transporte terrestre, sobre las concentraciones plasmáticas de cortisol, glucosa, ß-hidroxibutirato y lactato, actividad plasmática de CK, además de los valores de leucocitos y VGA. El estudio comprendió un experimento realizado en julio del 2001 y otro en noviembre del 2002, en la provincia de Valdivia, Chile.

Se utilizaron 120 novillos Frisón Negro, todos del mismo predio, de similar edad (dientes de leche y 2 dientes permanentes) y peso vivo (promedio 450 kg). En cada experimento se les extrajo una muestra de sangre por venopunción coccígea a 60 novillos, se identificaron individualmente y fueron pesados. Luego fueron asignados al azar en cuatro grupos de 15 animales cada uno: un grupo fue confinado en el predio sin agua ni comida por tres horas (confinamiento 3 h), al mismo tiempo otro grupo fue transportado en un camión por el mismo tiempo (transporte 3 h); los otros 2 grupos fueron sometidos a similares tratamientos respectivamente por 16 h (confinamiento 16 h y transporte 16 h). Después del tratamiento se les extrajo a los novillos una segunda muestra de sangre y fueron pesados.

El cortisol se determinó por radioinmunoensayo (RIA), la glicemia se midió con el procedimiento para glucosa GOD-PAP, sin deproteinización; el lactato se midió con el test UV enzimático; el ß-hidroxibutirato con la técnica que utiliza ß-HBA deshidrogenasa para medir la reducción de NAD+aNADH; el VGA y leucocitos con un contador hematológico y la actividad plasmática de CK se determinó con el método UV-cinético, a 340nm y 37ºC. Los indicadores de estrés fueron revisados para determinar su distribución normal mediante inspección visual del histograma y con la prueba de Kolmogorov-Smirnov. Cuando ambos, el histograma y la prueba de Kolmogorov-Smirnov indicaban que la distribución no era normal las variables se normalizaron transformándolas a su logaritmo natural. Se utilizaron modelos generalizados de regresión lineal múltiple para determinar las asociaciones entre los indicadores de estrés y las variables independientes. Las variables independientes fueron tratamiento (antes del confinamiento o transporte, confinamiento en ayuno por 3 h, transporte en ayuno por 3 h, confinamiento en ayuno por 16 h, transporte en ayuno por 16 h), y la estación del año (invierno y primavera).

Los novillos transportados por 3 h y aquellos en confinamiento por 16 h tuvieron concentracion es de Cortisol significativamente más altas (P<0.01) que antes del tratamiento; los otros tratamientos y la estación no afectaron significativamente (P=0.20) los niveles de Cortisol. El VGA disminuyó significativamente (P<0.01) en los novillos confinados por 3 h y aumentó significativamente (P=0.02; P<0.01) en los novillos transportados por 3 y 16 h, respectivamente. El promedio de VGA fue mayor (P<0.01) en invierno que en primavera. El recuento de leucocitos no mostró un patrón consistente, pero aumentó (P<0.01) en los novillos transportados por 3 y 16 h. La estación no influyó sobre el recuento leucocitario. Las concentraciones de glucosa aumentaron significativamente (P<0.01) con todos los tratamientos y fueron menores (P<0.01) en invierno que en primavera. Los novillos que ayunaron confinados por 3 h tuvieron una disminución significativa (P=0.02) del lactato sanguíneo respecto al valor inicial. Los animales ayunados por 16 h, tanto confinados como sometidos a transporte, tuvieron concentraciones significativamente menores (P<0.01) de ß-HBA que antes del tratamiento; el promedio de ß- HBA fue mayor (P<0.01) en invierno. Los novillos confinados y los transportados por 3 h mostraron actividad plasmática de CK significativamente superior (P<0.01 y P=0.02), respectivamente, que antes del tratamiento. En invierno, los niveles de CK fueron menores (P<0.01) que en primavera. Se concluye que, en general, el transporte asociado al ayuno produjo mayores aumentos de las concentraciones sanguíneas de cortisol, VGA, leucocitos y glucosa, siendo más estresante que el confinamiento en ayuno.

SUMMARY

The aim of this study was to determine in steers the effect of two periods of fasting, either confined on the farm or transported by road, on their blood concentration of cortisol, glucose, ß-HBA, lactate and the blood values of leucocytes; PCV and plasmatic activity of CK. The study included two experiments, carried out during July 2001 (winter) and November 2002 (spring), in the province of Valdivia, Chile.

One hundred and twenty steers from the same farm, breed, age (milk teeth or 2 permanent teeth) and live weight (average 450 kg) were used. In each experiment (winter – spring), 60 steers were bled by coccigeous venopunction, identified individually with ear tags and weighed. They were randomly allocated into four groups of 15 steers each: one group was transported by road for three hours without water or food, at the same time and under similar conditions, another group was kept confined in a pen at the farm. The other 2 groups were subjected to respectively similar conditions, but for a period of 16 hours. After treatments the steers were bled and weighed again.

Plasma concentrations of cortisol were determined by radioimmunoassay (RIA); the glucose concentrations by the GOD-PAP test without deprotenization (GL 2623, RANDOX®), lactate concentrations by the UVenzimatic method; ß-HBA by using the enzymatic technique that uses the ß-hidroxibutirate deshidrogenase enzyme for measuring the pass from NAD+ to NADH; PCV and leucocytes values by using the SYSMEX KX – 4N haematological counter and the CK plasma activity was measured by the UV kinetic method. The stress indicators were checked for a normal distribution by visual inspection of a histogram of the variables with the Kolmogorov-Smirnov test. When the distribution was not normal, the variables were normalised by taking a natural logarithm. Multivariable generalised linear regression models were used to determine the associations between the stress indicators and the independent variables. The independent variables were treatment (before transport or confinement, fasting in confinement for 3 hours, transported for 3 hours, fasting in confinement for 16 hours, and transported for 16 hours), and season (winter or spring).

Steers that were transported for 3 h and those fasted in confinement for 16 h had significantly higher (P<0.01) cortisol concentrations than before treatment; the other treatments and season did not significantly (P=0.20) influence the concentration of cortisol. PCV values were significantly (P<0.01) decreased in steers confined for 3 h and significantly (P=0.02; P<0.01) increased in the steers transported for 3 and 16 h, respectively. The PCV values were also higher (P<0.01)in winter than in spring. Leukocyte values in steers did not show a consistent pattern but increased (P<0.01) in steers that were transported both for 3 and 16 h. Season did not influence leukocytes values. Glucose concentrations significantly increased (P<0.01) with all treatments. In winter, glucose was significantly (P<0.01) lower than in spring. Steers that fasted in confinement for 3 h had significantly lower (P=0.02) lactate concentrations than before treatment. Steers in confinement for 16 h and those transported for 16 h had significantly (P<0.01) lower ß-HBA concentrations than before treatment. ß-HBA concentrations were significantly (P<0.01) higher in winter. Steers that were confined for 3 h and those transported for 3 h had significantly (P<0.01 P= 0.02) higher CK levels than before treatment. In winter, the CK activity was significantly (P<0.01) lower than in spring.

Palabras claves: bovino, estrés, transporte, confinamiento, ayuno.

Key words: cattle, stress, transport, confinement, fasting.