Variación de la Tasa de Enraizamiento Asociada al Número de Subcultivo y Diámetro de Microtallos de Castaño Castanea sativa Mill

• Introducción
• Materiales y métodos
• Resultados y discusión
• Conclusiones
• Reconocimientos
• Literatura citada

ABSTRACT: This study had the objective of determining  the subculture number and the shoot basal diameter that produces the best  rooting rate ex vitro of chestnut, Castanea sativa Mill., microshoots obtained via in vitro culturing.  The plant material corresponded to  microcuttings obtained from embryo cultures with between 7 and 12 subcultures in the proliferative  stage, for which Driver and Kuniyuki Walnut (DKW)  medium was used with the macronutrients reduced to a half and  supplemented with 1 mg L-1 6-benzylaminopurine (BAP) and 0.1 mg L-1 indole-3-butiric acid (IBA). The quick induction rooting method was used, submerging the base of the microcuttings in a solution of 0.5 mg mL-1 of IBA for 15 min. For the rooting stage, pine bark:perlite (4:1, v/v) substrate was used, carrying out the evaluation of results at 20 days after culturing. The evaluated variables were survival rate (%), rooting rate (%), root number, root length (mm), callus presence and visual aspect of the rooting system. The results showed a decrease of rooting capacity as the subculture number increases. The factor microcutting diameter did not present significant differences  with respect to the evaluated variables.

Key words: chestnut, micropropagation, in vitro culture.

RESUMEN: Este estudio tuvo por objeto determinar el número de subcultivo y el diámetro basal en el cual se obtiene la mayor tasa de enraizamiento ex vitro para microtallos de castaño, Castanea sativa Mill., obtenidos vía cultivo in vitro.  El material vegetal correspondió a microtallos provenientes del cultivo de embriones con entre 7 y 12 subcultivos durante la etapa de proliferación, para la cual se utilizó medio Driver y Kuniyuki Walnut (DKW) con los macronutrientes reducidos a la mitad y suplementado con 1 mg L-1 6-benzilaminopurina (BAP) y 0,1 mg L-1 de ácido indol 3-butírico (AIB). Se utilizó el método de inducción rápida de enraizamiento sumergiendo los tallos en una solución de 0,5 mg mL-1 de AIB durante 15 min. Para la etapa de enraizamiento, se utilizó como sustrato corteza de pino:perlita (4:1, v/v) evaluando los resultados a los 20 días de cultivo. Las variables evaluadas fueron tasa de supervivencia (%), tasa de enraizamiento (%), número de raíces, largo de raíces (mm), presencia de callo y aspecto del sistema radicular. Los resultados mostraron una disminución de la capacidad de enraizamiento a medida que aumenta el número de subcultivo. El factor diámetro de microtallo no presentó diferencias significativas respecto a las variables evaluadas.

Palabras clave: castaño, micropropagación, cultivo in vitro.

INTRODUCCIÓN

El castaño (Castanea sativa Mill.) presenta ventajas importantes para su cultivo en Chile respecto de otros países. Según Loewe et al. (1995), los rendimientos en producción de frutos son mayores a los promedios europeos, aún con un manejo rústico y sin elección de variedades, a lo que es posible agregar la ausencia de agentes patógenos de importancia (Benedetti y Subiri, 2000). Sin embargo, pese a las ventajas que presenta Chile para su cultivo, existen también inconvenientes importantes, entre ellos la escasez de oferta de castaño, que ha determinado en gran medida los bajos niveles de comercialización y los altos precios que alcanza la madera. En lo relativo al fruto, uno de los grandes problemas en la comercialización se debe a la falta de homogeneidad, calibre y desconocimiento de las variedades cultivadas, entre otras (Loewe et al., 1998).

Para corregir las limitaciones mencionadas anteriormente, es imprescindible contar con un stock suficiente de plantas de castaño de las variedades adecuadas para la comercialización del fruto. Esto no es posible a partir de plantas originadas de semillas, ya que se produce una gran variabilidad genética de los individuos resultantes. Por otro lado, dentro de las técnicas de propagación asexual, la macropropagación se hace difícil, ya que el castaño es una especie altamente recalcitrante, lo que dificulta su enraizamiento (Sierra, 2001). Sin embargo, mediante la micropropagación es posible producir masivamente plantas de diferentes variedades de castaño, cuyas características de producción y tipo de fruto ya se encuentran establecidos (Hartmann y Kester, 1998).

No obstante, es importante considerar que las características anatómicas y fisiológicas (como el diámetro de tallo y contenidos hormonales endógenos de las plantas micropropagadas) hacen necesaria para su supervivencia en condiciones ex vitro, una adaptación o aclimatación gradual a las condiciones medioambientales del invernadero y posteriormente del campo, siendo imprescindible contar con un sistema radicular adecuado (Gonçalves, et al., 1998).

Pierik (1990) señala que el proceso de formación del sistema radicular está influenciado por diversos factores. Entre éstos se menciona el número de subcultivos que han sufrido los microtallos antes de su enraizamiento. En cuanto a la importancia de este factor, se ha demostrado que la formación de raíces declina con los subcultivos sucesivos (Norton y Norton, 1986, citados por Pierik, 1990). Sin embargo, en cultivos de manzano (Malus domestica) var. Jonathan, se ha encontrado que con un número creciente de subcultivos, el porcentaje de enraizamiento aumenta, desde 0 hasta 100% después de nueve subcultivos. Respecto al cultivo del castaño, Sánchez et al. (1997) encontraron tendencia de un aumento del porcentaje de enraizamiento con subcultivos jóvenes (desde el 1° al 6° subcultivo). Sin embargo, no aclaran si esta tendencia continúa con subcultivos posteriores, o si se revierte. Por lo tanto, queda de manifiesto que el número de subcultivos influye en la tasa de enraizamiento de una especie micropropagada.

Por lo anterior, el  objetivo del presente trabajo fue determinar el número de subcultivos y el diámetro basal en el cual se obtiene la mayor tasa de enraizamiento ex vitro para microtallos de Castanea sativa obtenidos vía cultivo in vitro, parámetros necesarios de establecer cuando se necesita un programa de producción de plantas mediante técnicas de micropropagación.