Estabilidad química preliminar del sólido pulverulento de Parthenium hysterophorus, Linn, en base a partenina mediante la Cromatografía Líquida de Alta eficacia (HPLC).
Resumen
En el Departamento de Farmacia de la UCLV se desarrollan investigaciones analíticas y tecnológicas con el polvo de la planta Parthenium hysterophorus, Linn encaminadas a la obtención de una forma farmacéutica de utilidad antiparasitaria científicamente fundamentada, acorde a las exigencias de normativas establecidas por el Centro Estatal de Control de Calidad de los Medicamentos (CECMED) y en Farmacopeas internacionales, que garanticen de esta forma los requisitos de calidad, seguridad y eficacia exigidos al efecto.
En el presente trabajo se demostró que la humedad y la luz son factores que influyen negativamente en la estabilidad química de la partenina. La Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC) para la cuantificación de partenina en el sólido pulverulento del Parthenium hysterophorus, Linn, es específica bajo las condiciones de trabajo establecidas y puede emplearse en los estudios de estabilidad.
Palabras claves: Parthenium hysterophorus, partenina, HPLC, estabilidad.
MATERIALES Y MÉTODOS
Estudio de estabilidad inicial del estado sólido.
Procedimiento: Se realizó siguiendo la metodología descrita por Steele G, 2004. El muestreo fue realizado cada 15 días, se valoraron las características organolépticas de las muestras y se realizó la determinación cualitativa y cuantitativa del metabolito de interés, partenina, para lo cual se utilizó la Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC) y la Cromatografía en Capa Delgada (CCD) con las siguientes condiciones cromatográficas:
Cromatografía en Capa Delgada (CCD): Fase estacionaria: Sílica gel GF 60, dimensiones (8,1 x 4,5 cm) y 0,2 mm de espesor. Fase móvil: cloroformo: acetona (6:2). Revelador: Luz ultravioleta a una longitud de onda (λ) de 254 nm y posterior asperjado con disoluciσn de vainillina (0,5 g de vainillina, 10 mL de etanol, 3 gotas de ácido acético y 0,5 mL de ácido sulfúrico concentrado).
Cromatografía Líquida de alta eficacia (HPLC): Fase estacionaria: LiChrospher – 100 RP- 18, Fase móvil: acetonitrilo – agua (40:60), gradiente de elución: 10 min (40:60), 15 min (100 % acetonitrilo), 20 min (40:60), Flujo: 1,0 mL/ min, Detector: Longitud de onda variable; λ=210 nm, Volumen de inyecciσn: 10 μL
Procedimiento experimental
Se pesó 0,1 g del sólido pulverulento (tres réplicas), se colocaron en frascos ámbar y protegidos de la luz, y se mantuvieron durante tres meses en las siguientes condiciones: a) Estudio de estabilidad acelerada: 40°C ± 2°C/75% ± 5% HR, Condición del envase: frasco ámbar con tapón de goma protegido de la luz. (ICH, 2003), b) Estabilidad a largo plazo: 30°C ± 2°C/65% ± 5% HR (ICH, 2003), Condición del envase: frasco ámbar con tapón de goma protegido de la luz,
- Análisis de las características organolépticas: Se observó el comportamiento organoléptico, teniendo en cuenta el olor, color y aspecto de los sólidos pulverulentos a tiempo inicial y a los tres meses.
- Análisis Químico: Se aplicó la técnica de determinación cuantitativa de partenina en los sólidos pulverulentos de Parthenium hysterophorus, Linn., mediante HPLC a tiempo inicial y a los tres meses. Se realizó el cálculo del porcentaje sin degradar de partenina con relación a su concentración en la muestra inicial.
- Control microbiológico: Se realizó el control microbiológico de las condiciones analizadas de acuerdo a lo normado en la European Pharmacopeia, 2005.
Estudio de estabilidad. Condiciones de estrés
Procedimiento experimental. Se pesó tres réplicas correspondientes a 0,1 g del sólido pulverulento se colocaron en frascos ámbar y protegidos de la luz, y se mantuvieron durante tres meses en las siguientes condiciones:
Estudio de estabilidad acelerada: 40°C ± 2°C/75% ± 5% HR. Condición del envase: frasco ámbar con tapón de goma protegido de la luz. (ICH, 2003)
Ensayo de estrés de humedad: 25°C ± 2°C/80% ± 5% HR (ICH, 2003). Condición del envase: frasco destapado protegido de la luz.
Estabilidad a largo plazo: 30°C ± 2°C/65% ± 5% HR (ICH, 2003). Condición del envase: frasco ámbar con tapón de goma protegido de la luz.
Preparación de las muestras de ensayo: Coincide con lo reportado anteriormente.
Análisis de las características organolépticas: Se observó el comportamiento organoléptico, teniendo en cuenta el olor, color y aspecto de los sólidos pulverulentos a tiempo inicial y a los tres meses.
Análisis Químico: Se aplicó la técnica de determinación cuantitativa de partenina en los sólidos pulverulentos de Parthenium hysterophorus, Linn., mediante HPLC desarrollada para determinar el contenido de su principal ingrediente activo, la partenina, a tiempo inicial y a los tres meses. Se realizó el cálculo del por ciento sin degradar de partenina con relación a su concentración en la muestra inicial a tiempo cero.
Estabilidad acelerada y de vida estante
Procedimiento experimental. Se pesó tres réplicas correspondientes a 0,1 g del sólido pulverulento se colocaron en frascos ámbar y protegidos de la luz, y se mantuvieron durante tres meses en las siguientes condiciones:
Estudio de estabilidad acelerada: 40°C ± 2°C/75% ± 5% HR. Condición del envase: frasco ámbar con tapón de goma protegido de la luz. (ICH, 2003)
Estabilidad a largo plazo: 30°C ± 2°C/65% ± 5% HR (ICH, 2003). Condición del envase: frasco ámbar con tapón de goma protegido de la luz.
Análisis de las características organolépticas: Se observó el comportamiento organoléptico, teniendo en cuenta el olor, color, sabor y aspecto de los sólidos pulverulentos a tiempo inicial y a los tres meses.
- Análisis Químico: Se aplicó la técnica de determinación cuantitativa de partenina en los sólidos pulverulentos de Parthenium hysterophorus, Linn., mediante HPLC para determinar el contenido de su principal ingrediente activo, la partenina, a tiempo inicial y a los tres meses. (Polin L., 2006). Se realizó el cálculo del por ciento sin degradar de partenina con relación a su concentración en la muestra inicial a tiempo cero.
| Página siguiente |