Caracterización de las fibras del músculo gluteus medius en equinos por métodos histoquímicos e inmunohistoquímicos

• Material y métodos
• Resultados
• Discusión
• Agradecimientos
• Bibliografía

RESUMEN: Se tomó una biopsia a cuatro centímetros de profundidad en el músculo Gluteus medius de 16 equinos. Los animales tenían una edad promedio de 6 años y durante 3 meses previo a la toma de la biopsia no habían realizado entrenamiento. Las muestras fueron analizadas por medio de la técnica mATPasa miofibrilar, NADH-TR e inmuno-histoquímica. Los porcentajes de fibras tipo I, IIA, IIB oxidativas y no oxidativas fueron de un 14, 39, 30 y 17%, respectivamente, para la técnica histoquímica y un 16, 35, 29 y 20% para las fibras tipo I , IIA, IIX y IIA+IIX para la técnica inmuno-histoquímica. El análisis estadístico demostró que no existen diferencias signifi-cativas entre ambas técnicas para la determinación de las fibras. Los resultados obtenidos permiten concluir que la inmunohistoquímica es una técnica que permite realizar una clasificación adecuada de la población fibrilar del músculo Gluteus medius en equinos adultos.

SUMMARY: Biopsies were taken at a depth of 4cm from the Gluteus medius muscle of 16 horses. The animals were 6 years old and had not been trained during 3 months before the study. The samples were analized by mATPase miofibrillar technique to determine the fibrillar composition by NADH-TR technique to determine the oxidative capacity of the fibres and immunohistochemistry to determine the fibre type.

The histochemical study revealed an average fibrillar composition of 14, 39, 30 and 17 % for fibres typed I, IIA, IIX oxidative and IIX no oxidative and the inmunohistochemistry study showed 16, 35, 29 y 20% for fibres type I, IIA, IIX and IIA-IIX.

The statistical analyses showed a good relationship between the histochemical and inmunohistochemical method in the determination of fiber types.

The immunohistochemical method allows a good identification of the fiber in adult horses.

Palabras Claves: músculo, histoquímica, inmunohistoquímica, caballos Key words: muscle, histochemistry, immunohistochemistry, horses.

INTRODUCCIÓN

Los estudios sobre las características histoquímicas de los músculos esqueléticos de los equinos desarrollados en los últimos 25 años han establecido que estos son altamente complejos y que las propiedades contráctiles y metabólicas de ellos pueden determinar las cualidades funcionales y la capacidad de un individuo.

Tradicionalmente, la técnica histoquímica miosina adenina trifosfatasa miofibrilar (mATPasa) ha sido la metodología usada convencionalmente para la identifica-ción de las fibras musculares (López-Rivero y col., 1993), determinándose fibras tipo I, IIA y IIB, según las propiedades contráctiles y metabólicas de ellas, clasificándose en fibras lentas, rápidas e intermedias. La capacidad metabólica de las fibras se evalúa con la tinción nicotin adenina dinucleótido tetrazolium reductasa (NADH-TR), que permite clasificar las fibras tipo IIB en oxidativa y no oxidativa, según la intensidad de la tinción (Brooke y Kaiser 1970; Valberg y col., 1988).

Se ha demostrado que las propiedades contráctiles del músculo e intensidad de la tinción con mATPasa dependen de las cadenas pesadas de miosina de las fibras (Bottinelli y col., 1994) y que las técnicas histoquímicas no permiten identificar algunos tipos de fibras, en particular las hibridas que presentan coexpresión de las cadenas pesadas de miosina, (Shina y col., 1992) existiendo una alta diversificación de los porcentajes de los subtipos de las fibras rápidas en las regiones mas superficiales del músculo Gluteus medius en equinos jóvenes (López-Rivero y col., 1999).

La molécula de miosina es el componente primario de los miofilamentos y es la principal proteína contráctil de la fibra muscular. Esta molécula está compuesta por dos cadenas pesadas de miosina (MHC, Myosine Heavy Chain) y cuatro cadenas livianas de miosina (MLC Myosine Light Chain), identificándose en el músculo esquelético de los mamíferos distintas isoformas (Serrano y col., 1996).

Las técnicas de electroforesis e inmuno-histoquímicas utilizando anticuerpos mono-clonales han permitido una identificación mas específica de las MHC de las fibras musculares (Pette y Staron 1990). En estos estudios se ha demostrado que existen 4 formas de MHC en músculos de algunos mamíferos (I, IIA, IIX/IID y IIB), (Bärr y Pette, 1988), y fibras tipo I, IIA y IIX en músculos humanos (Smerdu y col., 1994), fibras puras tipo I, IIA y IIX y fibras mixtas (I+IIA y IIA+IIX) en equinos (Linnane y col., (1999), lo que indicaría que esta técnica permite una clasificación más objetiva de las fibras al compararla con la técnica histoquímica. Con la técnica inmuno-histoquímica las fibras denominadas IIX y IIA+IIX corresponden a las fibras clasificadas como IIB oxidativas y IIB no oxidativas utilizando la técnica mATPasa.

Este estudio tiene como objetivo comparar las técnicas histoquímicas e inmunohistoquímicas en la clasificación de la composición fibrilar del músculo Gluteus medius en caballos adultos.