Separación de lipidos individuales y lípidos neutros

Introducción: Los lípidos pueden clasificarse en lípidos neutros, como acilgliceroles y ésteres de colesterol, y lípidos anfipáticos, los cuales están compuestos por una porción polar y otra no polar, como fosfolípidos y colesterol libre. Dada su estructura molecular, son sustancias poco solubles en solventes polares, lo que permite aislarlos de los tejidos fácilmente utilizando solventes orgánicos.

Para separar los lípidos de una muestra se utilizan habitualmente técnicas cromatográficas, como la TLC o cromatografía en capa delgada. La misma puede realizarse en forma monodimensional o bidimensional, dependiendo de la naturaleza del compuesto a separar. Para separar fosfolípidos individuales se utiliza la cromatografía bidimensional en placas de sílica gel 60 en soporte de vidrio, utilizando como solvente de corrida una mezcla de solventes orgánicos alcalinos en la primer dimensión y una mezcla a pH acido en la segunda, distinguiéndose bandas correspondientes a fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilinositol, fosfatidilserina, ácido fosfatídico, etc.

La cromatografía monodimensional en palca de sílica gel 60 se utiliza en cambio para la separación de acilgliceroles, pudiéndose identificar bandas correspondientes a monoacilglicerol, 1,2 diacilglicerol, 1,3 diacilglicerol y triacilglicerol. Para la identificación de los compuestos en ambas técnicas se utilizan patrones conocidos y se revelan mediante la exposición de las placas a vapores de iodo (I2 ), los cuales colorean las distintas bandas permitiendo su visualización.

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Fabian Shalom